胃组织HE染色诊断幽门螺杆菌感染

临床消化病杂志 1999年第1期第11卷 论著

作者：李惠珍　袁福业　候晓华

单位：李惠珍　袁福业　同济医科大学附属协和医院病理科(武汉　430022)；候晓华　消化内科

关键词：幽门螺杆菌；HE染色；Giemsa染色

　　摘　要　目的：评价胃组织常规HE染色在诊断HP中的作用。方法：胃镜下钳取的 262例胃粘膜组织活检标本，分别进行Giemsa染色和HE染色，以Giemsa染色+尿素酶实验作为 标准，比较分析HE染色作为观察HP感染诊断的可能性。结果：HE染色显示了95%的诊断准确 率和96%的敏感性。结论：HE染色是观察HP的一种价廉、可靠的方法，但特异性尚不如Giems a染色。

Hemetoxylin and Eosin Staining of Gastric Tissue for the Diagnosis Infection of Helicobacter Pylori

　　Li Hui-zhen， Yuan Fu-ye， Hou Xiao-ha

　　Department of Pathology, Union Hospital, Tongji Medical University

　　Abstract Purpose: To assess hemetoxylin and eosin staining of g astric tissue, a relatively inexpensive and widely available method of helicobacter pylori(HP) detection. Methods:The hemetoxylin and eosin st ain was assessed as a mehtod of HP detection, analysis using giemsa staining+urea enzyme test as a standard in 262 gastric biopsy specimen s obtained from patients. Results: Performance of the hemetoxylin and eosin stain was accuary of 95% and sensitivity of 96%. Conclusion:The hemetoxylin and eosin stain is an inexpensive method of HP detection but with test performance characteristics inferior to giemsa stain.

　　Key words Helicobacter pylori Hemetoxylin and eosin stain Giemsa stain

　　大量研究资料表明，幽门螺杆菌(Helicobacter　pylori,　HP)感染与 慢性胃炎、消化性溃疡、粘膜相关性淋巴瘤的病理发生有关，还可能是胃癌的协同致癌因子 ^［1］。诊断HP感染的方法很多，如：细菌培养、Warthin-Starry银染色、Giemsa染 色、尿素酶试验、血清抗HP抗体等。常规组织切片HE染色HP也能被显示，本研究的目的就是 以Giemsa染色+尿素酶实验作为标准，对比评估常规组织HE染色作为诊断HP方法的可能性。

　　1　材料与方法

　　1.1　标本来源：262例来自本院内窥镜钳取的十二指肠溃疡病成年患者的胃粘膜标本(每例取胃体、胃窦各2块)，其中233例为溃疡活动期，29例为溃疡愈合期。男 194例，女68例，年龄18～65岁，平均42岁。

　　1.2　检验方法：标本首先压片进行尿素酶试纸法检测，然后经10%福尔马林固定，石腊包埋，切片厚度为3～4　μm，每个组织块进行连续切片3～4张，分别进行 苏木素(Haris'苏木素)-伊红(HE)染色及改良Giemsa染色(①石腊切片常规脱腊复水，②入2 %　Giemsa染色30分钟，③自来水洗，④迅速入纯酒精内脱水，⑤二甲苯透明，树胶封固)。

　　1.3　结果判断：尿素酶试纸呈红色，Giemsa染色及HE染色找到细菌为阳性结果。我们在组织切片上对HP进行分级，参考杨海涛等^［2］半定量法分为Ⅰ～Ⅳ级：Ⅰ级，阴性，即未见HP；Ⅱ级偶见，需要仔细观察才能找到少量HP；Ⅲ级，介于Ⅱ级至Ⅳ级之间；Ⅳ级，整个粘膜上皮表面可见到大量HP。

　　2　结　　果

　　262例Giemsa染色+尿素酶实验有233例HP阳性(Ⅳ级115例，Ⅲ级83例，Ⅱ级35例)，29例阴性。HE染色切片上有229例HP阳性(Ⅳ级110例，Ⅲ级74例，Ⅱ级45例)，33例阴性。二者HP分级无显著差异(P＞0.05)，见表1。诊断准确率为94.6%，敏感度为96.1%，阳性预测值97.8%，阴性预测值73.7%，见表2。

表1　Giemsa与HE染色HP的分级比较

　P＞0.05

表2　HP对比Giemsa的HE检测

　准确率：248/262=94.6%　敏感度：224/223=96.6%

　　阳性预测值：224/229=97.8%　阴性预测值：24/33=73.7%

　　3　讨　　论

　　检查HP感染的方法众多，但金标准是细菌培养或观察胃粘膜活检标本的Warthin-Starry银染色^［3］，细菌培养费时较长，需一定的条件和技术，且操作较繁琐，价格较贵 ^［4］。改良Giemsa染色操作简单、快速，检出效果与银染色相似，甚至敏感性还高 于后者^［4］，但仍为一种附带的染色，也随之加上了附带的费用。常规组织切片HE 染色HP为一种呈“S”形、弧形或弯曲形的淡紫色细菌，其位于胃粘膜的粘液层下面、上表 细胞表面、胃小凹内，因此根据在组织切片的形态特点及分布特征可正确诊断HP感染。本研 究以Giemsa染色+尿素酶实验为标准，其结果超过了Fallone等^［5］报告的结果(其诊 断的准确率及敏感性分别为92%和93%)。HE染色与其它检测HP方法比较，避免了HP培养需要 微氧设备与技术，培养周期长，银染色法繁琐费时，血清学不能表示现症感染及C-UBT设备 复杂和费用昂贵，难以推广等缺点。

　　本研究中出现9个假阴性结果(占3.8%)，这9例的Giemsa染色显示细菌较少(均在Ⅱ级)。HE染色切片有4例伊红染色太淡且不均匀，5例切片质量欠佳且背景染料沉渣多，故造成HP辨认困难，出现假阴性结果。由于有一个假阴性结果，那些患者不能得到及时的治疗，因此可用一个更敏感的染色如Giemsa来避免。依靠HE染色的另一潜在问题就是要求病理科医生熟练掌握观察HP的技巧，否则就会导致一个较低的诊断准确率。值得一提的是本研究还出现了5个假阳性结果。重复阅片时，发现细菌为短杆状，未见典型的HP形态，故HE染色诊断HP必须是见到形态典型的HP方可下诊断，否则就有可能出现假阳性的结果。

　　总的来说，HE染色诊断HP尽管不如Giemsa染色清晰、易辨，但它仍显示了95%的诊断准确率，不失为一种简便易行、廉价可靠，在观察组织学改变的同时又可观察HP的方法。

　　(本文承蒙我院胃镜室大力协助，特此致谢)

　　参考文献

　　1 Blaser MJ. Helicobacter pylori phenotypes associared with peptic ulceration. Scand J Gastroenterol，1994,29(suppl 205)∶1～5．

　　2 周殿元，杨海涛，张万岱主编．幽门螺感菌与胃十二指肠疾病：幽门螺感菌的研究方 法.上海：上海科学技术文献出版社，1992，468．

　　3 Marshall BJ. Helicobacter Pylori. Am J Gastroenterol，1994,89∶116～28．

　　4 周殿元，杨海涛，张万岱主编.幽门螺感菌与胃十二指肠疾病：组织学方法诊断幽门 螺感菌感染.上海：上海科学技术文献出版社，1992，154．

　　5 Garlo A. Fallone, Vivian G Loo, John Lough, el al. Hematoxylin and eosin staining of gastric tissue for the detection of helicobacter pylori. Helicobacter，1997,2(1)∶32.

(1998　06　05收稿)