CD44s在胃癌中的表达

医学新知杂志 2000年第1期第10卷 论著

作者：黎家庆　朱尤庆　吴菲

关键词：CD44s；胃癌；病理学；预后

摘　要：研究CD44s的表达与胃癌临床病理特征之间的关系，以明确CD44s在胃癌发展和预后中的作用。应用抗CD44s单克隆抗体免疫组化染色技术检测了97例胃癌标本。结果显示部分正常胃腺体中下2/3的细胞膜和23.71％(23／97)的胃癌细胞被染成棕红色，免疫反应位于肿瘤细胞的胞膜上；硬癌CD44s表达率较高(P＜0.05)，浸润型胃癌CD44s强表达率较显著；CD44s表达与胃癌淋巴管浸润和淋巴结转移显著相关(P＜0.05)；CD44s强阳性表达胃癌患者术后5年生存率显著降低(P＜0.05)。提示CD44s异常表达可能参与了胃癌的发展并可能影响患者的预后。

Expression of CD44s in gastric Carcinoma

Li Jiaqing（The First Hospital of Beijing Medical University, Beijing 100034）

　　zhu Youqing（The Second Affiliated Hospital of Hubei Medical University, Wuhan 430071）

　　wu Fei（Beijing Ditan Hospital, Beijing 100011）

Abstract：To investigate the effect of CD44s on the development and prognosis in gastric carcinoma, the relationship between CD44s expression and clinical pathological features of gastric carcinoma was performed in this study. Ninety seven specimens of gastric carcinoma were stained using immunohistochemical technique by antiCD44s monoclonal antibody. Results showed that a partial normal gastric glandular cell membrane in the middle-below position of gastric gland and cancerous cells(23.71%, 23/97 cases) were stained with palm-red color. a higher rate of CD44s expression was found in gastric scirrhous carcinoma (P＜0.05), there was a striking strong expression of CD44s in gastric infiltrated carcinoma, CD44s expression was remarkble related to lymphangial infiltration of gatric carcinoma and metastasis of lymphatic gland (P＜O.05), the survial rate of 5 year after surgical operation of the patients was a evident decline when having a strong expression (P＜0.05). Conclusion: A abnormal CD44s expression may intervene the development of gastric carcinoma and affect the prognosis of the patients.

　　Key words：CD44s; Gastric carcinoma; Pathology; Prognosis

　　不同的CD44亚型在各种肿瘤中的作用可能有所不同，为探讨CD44标准体CD44s在胃癌进展和预后中的作用，我们采用免疫组化法检测了97例胃癌患者胃手术标本CD44s的表达，以研究其与胃癌临床病理特征之间的关系。

1　材料与方法

1.1　对象　1987～1991年间胃癌手术患者97例，其中男73例，女24例，年龄65(平均35～88)岁。患者的临床病理及预后均于1996年12月30日前收集确证完毕。选取每例患者肿瘤中心及肿瘤边缘石腊块1～2个，制成3 μm的连续切片，作HE和免疫组化染色。

　　1.2　免疫组化染色　按ABC法染色^［1］。切片经二甲苯脱腊、酒精水化后浸入0.3%的过氧化氢内100℃，30 min，阻断内源性过氧化酶活性。在0.01 M、pH6.5的柠檬酸缓冲液内加热至10℃，30 min，充分暴露组织抗原。4℃下经鼠抗人CD44s单抗(Chemicon国际公司，1∶5倍稀释)培育过夜后，室温下与兔抗鼠单抗反应20 min，再与过氧化酶复合物反应15 min(Histofine药盒，Nichirei公司，东京，日本)。随后经DAB显色反应15 min，苏木精染色1 min，脱水、透明、封片。

　　1.3　结果评价　临床、病理片(如胃癌的组织学类型及病理巨检划分等)依据日本《胃癌研究的一般规则》第12版进行评价。组化片每张选择5个不同的代表性区域(即肿瘤中心部位、垂直浸润前沿2端、水平浸润前沿2端)分别进行细胞计数。每个区域计数200个细胞，每例共计数1 000个细胞，然后计算染色细胞数及平均百分率，即染色细胞的平均百分率=(染色细胞数/1 000)×100%。CD44s染色结果划分为三级：阴性(-)，染色细胞数少于10%；阳性(+)，染色细胞数介于10%～50%之间；强阳性(++)，染色细胞数超过50%^［2］。CD44s阳性和强阳性染色为总阳性，等同于异常表达。

　　1.4　统计分析　t检验，χ²检验，Kaplan-Meier检验。P＜0.05被认为有显著性差异。

2　结果

2.1　CD44s在正常和癌组织中的表达　部分正常胃腺体中下2/3的细胞膜被染成棕红色，胞浆呈轻度棕黄色，胞核不染。胃癌细胞膜及部分癌细胞胞浆呈棕红染色反应，胞核不染。染色细胞在癌组织中的分布不均匀，呈异质性，CD44s的阳性率为18.56%(18/97)，强阳性率为5.15%(5/97)，总阳性率为23.71%(23/97)。

　　2.2　CD44s的表达与临床病理特征的关系　CD44s的表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小、部位、组织学类型等无关。然而，与病理巨检显著相关(如表1所示)，16例溃疡局限型癌中均无CD44s的表达。与胃癌的间质量相关，髓样癌、中间型和硬癌CD44s的总阳性率逐渐增高。有淋巴管浸润者CD44s的强阳性率显著高于无浸润者。有淋巴结转移者CD44s的强阳性率也显著高于无转移者。

表1　胃癌CD44_S的表达与临床、病理特征间的关系

注：NS表示无显著性差异

　　2.3　CD44s的表达与预后的关系　如图1所示，在97例胃癌中，CD44s强阳性表达者的5年生存率明显低于阳性组和阴性组(P=0.08)。而图2所示根治性手术患者中，CD44s强阳性表达组的5年生存率也显著低于阳性组和阴性组(P＜0.01)。

图1　CD44s的表达与胃癌患者预后的关系注：①阳性组(n=18)，72%；②阴性组(n=74)，51%；③强阳性组(n=5)，42%。　　P=0.08

图2　CD44s的表达与胃癌根治术患者预后的关系注：①阳性组(n=16)，81%；②阴性组(n=65)，58%；③强阳性组(n=5)，40%。　　P＜0.01

　　3　讨论

　　CD44是一种在多种细胞膜上均有表达的糖蛋白，其基因包含20个编码顺序，位于11PB染色体上。它分为标准体(CD44 Standard, CD44s)和变形体(CD44 Variant, CD44v)两大类。CD44s是由20个编码顺序中氨基端的前5个和羧基端的后5个编码顺序转录形成的分子量最小的分子^［3］。

　　CD44是一种多功能的受体。它涉及细胞与细胞间、细胞与细胞外间质间的相互作用，以及细胞游走、淋巴细胞回归、生长信号传递和生长素传递等等。它参与了多种恶性肿瘤的发生和发展过程，并影响肿瘤患者的预后。然而，CD44的不同亚型在同一种肿瘤中的作用可能有所不同，同一亚型的CD44在不同种类的肿瘤中的作用也可能不同^［4］。

　　正常组织的更新、胚胎发生、创伤愈合等生理过程都依赖于细胞的生长和迁移。处于生长迁移状态下的细胞、细胞与细胞外间质间有许多透明质酸和CD44聚集，它们的相互作用可影响细胞的生长和运动。同样，恶性肿瘤细胞的增殖在某些方面与正常组织更新、创伤愈合等过程相似，在其发生发展过程中亦有赖于细胞生长、迁移和CD44的正常生理功能^［4］。研究显示，部分正常胃腺体中下2/3的细胞呈CD44s阳性反应，这与该部位的细胞处于增殖和向上迁移以保证胃粘膜更新是一致的。胃癌细胞CD44s的总阳性率为23.71%，与Ruey-long Hong等^［5］的报道相近，但低于Barbara^［6］的结果，推测CD44s参入了肿瘤的发生和发展。

　　研究表明：CD44s的表达与胃癌的间质量显著相关。硬癌的间质量丰富，其CD44s表达显著较高。CD44的表达与浸润型生长方式明显有关。CD44参与透明质酸的摄取和降解，透明质酸作为CD44的主要配体、间质的主要成分之一，为细胞的粘着、游走、生长、分化以及定位提供了一个富含水的空间并且支持细胞的生长，为细胞的游走提供了一个低阻力的微环境^［4］。因此，异常表达的CD44s可能通过透明质酸而使肿瘤细胞的运动变得容易，从而有助于肿瘤细胞在间质中的浸润。研究还表明CD44s的表达与淋巴管浸润及淋巴结转移明显有关。CD44s是淋巴细胞回归淋巴结的引导受体^［3］，因此异常表达CD44s的胃癌细胞可能利用了淋巴细胞回归淋巴结的正常生理机制而浸润淋巴系统。同时，转移细胞的CD44s依赖性聚集可以使肿瘤细胞逃避免疫监视，增强其在靶器官中的安全性。故CD44s可能参与了胃癌细胞在淋巴系统的浸润和转移。

　　研究结果还显示，CD44s的表达呈现强阳性时，患者的预后不良。除了粘着功能外，CD44受体还作为一个辅助分子，与其它分子一起从细胞膜向细胞核内传递生长信号。同时它还参与CD44依赖性生长因素的传递^［2］。异常表达的CD44s可能促进了胃癌的生长。故异常表达的CD44s可能导致胃癌的不良预后。

　　作者简介：黎家庆，男，36岁，博士；北京，北京医科大学第一医院外科(100034)

　　作者单位：黎家庆（北京医科大学第一医院外科　北京　100034）

　　朱尤庆（湖北医科大学附属第二医院内科　武汉　430071）

　　吴菲（北京市地坛医院外科　北京　100011）

　　参考文献：

　　1　Kay W T, Marcia R G, Marilyn J T. Expression of the cell adhesion molecule CD44 in gastric adenocarcinomas. Human Pathology, 1994,25(10):1043

　　2　Castela E, Ariza A, Fernandez-Vasalom A, et al. Exp-

　　ression of CD44H and CD44v3 in normal oesophagus, Barrett mucosa and oesophageal carcinoma. J Clin Pathol. 1996,49(6):489

　　3　Ursula Gunthert, Reinhard Stauder, Barbara Mayer, et al. Are CD44 variant isoforms involved in human tumour progression? Cancer Surv. 1995,24(1):19

　　4　David Naor, Ronit Vogt Sionov, Dvorah. Ish-Shalom CD44: structure, function, and association with the malignant process. Adv-Cancer-Res. 1997,71(2):241

　　5　Ruey-Long Hong, Wei-Jee Lee, Chia-Tung Shun, et al. Expression of CD44 and its clinical implication in diffuse-type and intestinal-type gastric adenocarcinomas. Oncology, 1995,52(4):334

　　6　Barbara Mayer, Karl W Jauch, Ursula Gunthert, et al. De-novo expression of CD44 and survival in gastric cancer. Lancet, 1993, 342(8878):1019

收稿日期：1999-01-12