神经元特异性烯醇化酶异常表达对肺癌诊断价值的研究

中华结核和呼吸感染 2000年第5期第23卷 论著摘要

作者：吴玮　姚登福　曹飞　吴信华　陆建新　邱历伟　林美华

单位：226001 江苏省南通医学院附属医院内科

　　肺癌一直是危害人类健康的多发病和常见病，也是当今恶性疾病死亡的主要原因之一。 神经元特异性烯醇化酶（NSE）是糖酵解中的酶-烯醇化酶的同工酶，广泛存在于中枢和周 围 神经组织及小细胞肺癌（SCLC）中，近来发现在非小细胞肺癌（NSCLC）中也有升高。 对各种肺癌的组织、血清进行了NSE测定，以探讨NSE在肺癌中的作用。

　　材料与方法　(1)人肺组织标本:收集1999年4月～1999年8月手术后 新鲜肺癌组织21 份。立 即于-85℃冰箱保存。经病理切片诊断，鳞癌12例，腺癌7例，小细胞肺癌2例。(2)肺 癌 病人血清：收集本院1998年～1999年住院病人中的原发性肺癌68例（男 50 例，女18例） ，其中小细胞肺癌 32例，另收集良性肺疾病27例。(3)肺组织匀浆制备:肺组织以0.9% NaC l洗去血迹，滤纸吸干并剪碎，称取约100 mg置匀浆器中，加2 ml pH 7.0磷酸缓冲液，反 复研 磨2 min，匀浆液于4℃冰箱过夜，再以15 000 r/min在高速冷冻离心机中离心15 min，吸出 上 清液于-85℃保存。(4)匀浆液NSE活性及蛋白浓度测定:肺组织匀浆液中NSE活性测定采用酶 联免疫吸附试验（ELISA）测定，试剂盒由北京邦定生物医学公司提供。蛋白浓度以福林酚 试剂法测定。根据酶活性与蛋白浓度计算NSE比活性（U/g蛋白）。(5)统计学处理:数据结果 用±s表示，采用t检验。

　　结果　组织中NSE水平明显高于癌旁及远癌组织（P＜0.001），癌旁与远癌比较无统计学意义 （P＞0.05）,良性肿瘤患者血清NSE水平大部分正常，仅1例高于正常组，而肺癌组NSE 水平明 显高于正常组及良性肿瘤组（P＜0.01）。非小细胞肺癌组与小细胞肺癌组NSE差异 无显著性(P＞0.05,见表1)。

表1　肺癌不同组织NSE浓度变化及各种肺病血清NSE的浓度（U/g蛋白,±s）

　　注:与癌组织比较,^*P＜0.001，与正常对照比较,^**P＜0.01　　讨论　烯醇化酶是参与糖酵解的一组酶，由α、β、γ三种亚基 以二聚体的形式组成，共有 五种同工酶，其中γ型特异的存在于神经元和神经内分泌细胞中，称为神经元特异性烯醇化 酶，它是神经母细胞瘤的肿瘤标记物。

　　国内外已有报道，具有神经内分泌功能的小细胞肺癌，其血清中NSE明显升高。据Pinson等 ^［1］报道SCLC患者中73% NSE 异常，且有转移病灶的病人其浓度明显高于无转移 病灶者。 而良性肺疾病患者仅有4%阳性。Pujol等^［2］也报道小细胞肺癌病人其 NSE水平与 疾病的死 亡风险成明显正相关，NSE＞12.5比 NSE＜12.5 死亡风险高2.23倍。近几年来有不少学者 ^［3］ 认为NSE 不仅在小细胞肺癌中明显升高，在一些非小细胞肺癌中也有明显升高者，总阳性率 达50%左右。本研究测定了68 例原发性肺癌患者和27例良性肺病患者血清NSE浓度，结果表 明原发性肺癌患者血清NSE水平为(18±12) U/g蛋白，其中NSCLS 者NSE水平为(20±9) U/g蛋白；而良性肿瘤患 者仅1例升高，且发现SCLC组与NSCLC组两者比较，NSE水平及阳性率的差异无显著性（P ＞0. 05）；而两者与良性肺病组比较差异均有显著性（P＜0.01）。有资料表明^［4］ ，来自肺癌的 细胞株（SCLC及NSCLC）均表达大量NSE。本研究中，我们测定了21例肺癌标本，其中癌组织 NSE水平明显高于癌旁及远癌组织（P＜0.001）。提示NSE分子水平上的改变可能是 引起肺组 织癌变的原因之一。为进一步揭示NSE水平在肺癌组织中的变化规律及其分子学机理，还需 作更多的研究。

参考文献

　　1，Pinson P, Joos G, Watripont P, et al. Serum neuron-specific enolase as a tu mo r marker in the diagnosis and follow-up of small cell lung cancer. Respiration ,1997, 64:102-107．

　　2，Pujol JL, Boher JM, Grenier J, et al. Neuron-specific enolase (NSE) in the surv eillance of small cell cancers. An evaluation of the prognostic information usi ng Markov′s model. Rev Mal Respir,1998,15: 519-525．

　　3，Kimura H, Yamaguchi T, Nishino K, et al. Clinical significance of serum neuron - specific enolase in non-small cell lung cancer. Nihon Kokyuki Gakkai Zasshi , 1998, 36:128-132 ．

　　4，Poola I,Graziano SL.Expression of neuron-specific enolase,chr omogranin A, syna ptophysin and leu-7 in lung cancer cell lines. J Exp Clin Cancer Res,1998,17: 165-173．

(收稿日期：1999-09-02）