幽门螺杆菌感染对胃窦粘膜TNF-α和PDGF水平的影响

中国人兽共患病杂志 1999年第3期第15卷 实验研究

作者：张国安　刘小朋　张　信　陈紫榕　施水兰　史玉波

单位：福州解放军第476医院（福州，350002）

　　关键词： 幽门螺杆菌；肿瘤坏死因子；血小板源生长因子

　　摘　要　检测幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori,Hp)感染胃炎患者胃窦粘膜体外培养上清液中肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)和血小板源生长因子(Platelet-derived Growth Factor,PDGF)水平。结果表明，Hp阳性胃炎患者胃窦粘膜TNF-α含量和PDGF活性均明显高于Hp阴性患者和正常对照组，合并活动性胃炎患者胃窦TNF-α含量和PDGF活性也明显高于非活动性胃炎。

EFFECT OF HELICOBACTER PYLORI INFECTION ON ANTRAL MUCOSAL TUMOR

　　NECROSIS FACTOR-α AND PLATELET-DERIVED GROWTH FACTOR LEVELS

Zhang Guoan Liu Xianpeng Zhang Xin Chen Zirong Shi Xunlan Shi Yube

　　(476th Hospital of PLA,Fuzhou 350002)

　　ABSTRACT　The levels of tumor necrosis factor-α(TNF-α) and Platelet-derived growth factor(PDGF) in human antral mucose of patients with H.pylori(Hp) infection were investigated by radioimmunoassay and bioactivity assay.The results showed that antral TNF-α and PDGF levels in patients with Hp infection were significantly greater than those in patients without Hp infection and normal controls.TNF-α level was significantly higher in patients with active gastritis than in those with inactive gastritis.In contrast,PDGF activity were raised in both active and inactive gastritis.

　　KEY WORDS　Helicobacter pylori Tumor necrosis factor-α Platelet-derived growth factor Gastric mucosa

　　幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori,Hp)感染作为慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病因素已得到证实。肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)和血小板源生长因子(Platelet-derived Growth Factor,PDGF)是一组具有多种生物学活性的细胞因子，是机体炎症反应和一系列病理过程的重要介质^〔1〕。有研究表明：Hp感染可引起胃粘膜大量炎症细胞浸润及免疫反应^〔2〕。我们对Hp感染者胃窦粘膜TNF-α、PDGF产生的改变进行了研究，以探讨TNF-α和PDGF在Hp相关性胃炎发病机理中的作用。现将结果报告如下。

　　1　材料与方法

　　1.1　研究对象

　　 1.1.1　胃炎组　36例，男26例，女10例。平均年龄38.4(25～57)±9.8岁，胃炎程度参照Whitehead等分组标准^〔3〕。其中Hp阳性28例，阴性8例。

　　 1.1.2　对照组　10例，男6例，女4例，平均年龄36.8（24～59）±10.1岁。经胃镜和组织学检查胃粘膜大致正常，Hp检测阴性，无其它系统慢性感染性疾病。

　　所有研究对象检查前1周均未接受过抗生素、铋剂及H₂受体阻滞剂等药物治疗。在胃镜直视下距幽门2.5mm大、小弯，前、后壁侧各取粘膜标本1次，分别用于病理学检查、Hp检测及TNF-α、PDGF测定。Hp感染的诊断采用快速尿素酶试验和ELISA方法检测Hp抗体IgG，两项检查均阳性者判为Hp感染，均阴性者为无Hp感染。

　　 1.2　研究方法

　　1.2.1　胃窦粘膜培养上清液的制备　胃窦粘膜标本取材后立即放入含10％胎牛血清的RPMI 1640(Gibco)液(1.0ml)中，置37℃孵育24h，研磨匀浆后离心2500r/min，20min,取上清液置-30℃冰箱保存待测TNF-α含量和PDGF活性。粘膜蛋白含量采用改良Lowry法测定^〔4〕。另10例Hp阳性胃炎患者胃窦粘膜分别加入2μg/ml的抗TNF-α抗体（军事医学科学院供）或2μg/ml的抗PDGF抗体(Sigma)，孵育24h，匀浆离心后取上清液分别测定PDGF活性和TNF-α含量。

　　 1.2.2　TNF-α含量的测定　采用RIA法，试剂盒为上海长征医学科学有限公司售品。

　　 1.2.3　PDGF活性的测定　采用细胞生物活性法^〔5〕，以1％FBS促进L929细胞增殖活性的表达为PDGF的一个活性单位。

　　 1.3　数据处理　每份标本行测定3孔，求平均值。各组间均数比较采用t检验。TNF-α和PDGF之间相互关系采用直线相关分析。

　　2 结果

　　2.1　Hp阳性患者胃窦粘膜TNF-α和PDGF的水平　Hp阳性慢性胃炎患者胃窦粘膜TNF-α含量和PDGF活性均明显高于Hp阴性组和对照组，但Hp阴性组和对照组之间却没有明显的差异（见表1）。直线相关分析表明，Hp阳性患者胃窦粘膜TNF-α和PDGF呈正相关(n=28,r=0.613,P＜0.01)。

表1　Hp阳性患者胃窦粘膜和TNF-α和PDGF水平

　　Tab 1 Antral mucosal TNF-α and PDGF levels in patients with Hp infection

*P＜0.05 Compared with Hp positive group

　　2.2　TNF-α和PDGF与活动性胃炎的关系

　　被检患者中慢性活动性胃炎者26例，非活动性胃炎者10例。活动性胃炎患者胃窦粘膜TNF-α含量和PDGF活性均显著高于非活动性胃炎患者（见表2）。

表2　　慢性胃炎患者胃窦粘膜TNF-α和PDGF的水平

　　Tab 2 Antral mucosal TNF-α and PDGF levels in patients with gastritis

　　2.3　中和抗体对胃窦粘膜TNF-α和PDGF产生的影响　Hp阳性患者胃窦粘膜培养物中加入2μg/ml的抗TNF-α抗体，孵育24h后，PDGF的水平明显降低，为16.9±5.1U/mg蛋白，与未加抗体组相比较，差异显著（P＜0.05）；而加入抗PDGF抗体对TNF-α的产生明显影响。3 讨论

　　PDGF是sis原癌基因的表达产物，被认为是一个潜在的“活化”胃癌细胞的生长因子^〔10〕。本研究发现，Hp阳性胃炎患者胃窦粘膜PDGF活性和TNF-α含量之间呈正相关，经抗TNF-α抗体处理可使Hp阳性胃炎患者胃窦粘膜的PDGF活性降低。因此，在Hp感染时，可能首先引起胃窦粘膜的TNF-α表达水平增高，而TNF-α则通过促使胃窦G细胞合成或释放Gas而参与Hp感染所致慢性胃炎的病理过程；TNF-α又作为PDGF的强诱生剂促使胃窦粘膜持续表达高PDGF活性，PDGF活性的持续升高可能与Hp相关性胃癌的发病机理有关，其确切的作用，有待进一步研究。

　　4 参考文献

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1998年7月3日收稿　1998年12月15日修回