前列腺增生症及前列腺癌组织中IL-6受体基因表达水平的检测

中华泌尿外科杂志 1998年第4期第19卷 简　　报

作者：肖亚军　鲁功成　赵军

　　白细胞介素6(IL-6)与多种肿瘤发生发展有关。本研究采用PCR方法检测了20例前列腺增生症(BPH)及6例前列腺癌(PCa)组织中IL-6受体基因表达水平。报告如下。

　　材料和方法　正常前列腺、BPH及PCa组织标本分别为10例、20例及6例。均经开放手术获取，并经病理学确诊。按AGPC法提取组织总RNA。甲醛凝胶变性电泳鉴定RNA质量，紫外分光光度计定量。依逆转录试剂盒说明进行cDNA合成。参照文献设计IL-6R及β₂微球蛋白(β₂MG)特异性引物，由北京赛百盛生物工程公司合成，其产物扩增片段长度分别为611bp及126bp。100μl pCR反应体系中，加入cDNA混合物2μl，10mmol/L dNTP 2μl，10μmol/L引物各5μl，Taq dNA聚合酶2.5U，94℃变性45秒，55℃退火30秒，72℃延伸90秒，扩增40个循环。取10μl终产物经2%琼脂糖凝胶电泳观察DNA扩增带，EB染色。用图像处理系统扫描凝胶上PCR产物带密度，以IL-6R与β₂MG的扩增产物带含量之比(IL-6R/β₂MG)表示组织中IL-6R基因的相对表达水平。

　　结　果　PCR产物电泳结果表明β₂MG表达较稳定，每个样本含量基本相等。但不同样本IL-6R的表达量差异较大。正常前列腺、BPH及PCa组织中IL-6R mRNA表达水平分别为：0.36±0.22、0.71±0.29、0.78±0.31。BPH组与PCa IL-6R含量均明显高于正常组，P＜0.01，有极显著性差异。而BPH组与PCa组间比较P＞0.05，无显著性差异。

　　讨　论　IL-6是一种多功能细胞因子，对细胞的生长、分化具有调节、诱导作用。IL-6受体系统由80000的α链(IL-6R)和130 000的β链(gp130)组成，IL-6通过与其受体结合而发挥生物学功能。现已证明，IL-6R表达于多种正常组织细胞，如T、B淋巴细胞、肝细胞等。本研究采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法定量检测了10例正常人前列腺组织中80000IL-6R基因的表达水平，结果均获阳性低表达。因此，认为IL-6及其受体对前列腺正常生理功能有一定调节作用。

　　对20例BPH及6例PCa组织标本进行IL-6R mRNA定量检测，结果所有组织标本均呈阳性表达，较正常前列腺组织明显增强。BPH与PCa组内无显著性差异。研究发现，BPH上皮细胞及PCa细胞均能分泌高水平IL-6，血清中IL-6水平与PCa的临床指标有关。认为IL-6及IL-6R在BPH及PCa的发生、发展中起一定作用。

　　本研究由于采用以IL-6R/β₂MG来表示IL-6R mRNA相对含量，实验方法简便。以β₂MG为内对照，去除了实验过程中尤其是PCR反应体系诸多因素的干扰，实验结果准确、可靠。