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胃肠外营养添加精氨酸对胃癌术后患者淋巴细胞免疫功能的作用

胃肠外营养添加精氨酸对胃癌术后患者淋巴细胞免疫功能的作用

中国普外基础与临床杂志 1999年第2期第6卷 临床研究

作者:王 颀 王吉甫 彭俊生

单位:王 颀 广东省妇女儿童医院外科(广州 510010);王吉甫 彭俊生 中山医科大学附一院外科

关键词:胃肠外营养;精氨酸;胃癌;免疫功能

  摘要 为探讨胃肠外营养(TPN)添加精氨酸(Arg)对胃癌术后患者淋巴细胞免疫功能的影响及意义,对36例胃癌术后患者进行了TPN支持的前瞻性研究,检测常规TPN和TPN添加Arg支持前后患者的T淋巴细胞亚群、NK细胞活性、IL-2和CD25水平变化。结果:常规TPN支持前后患者的T淋巴细胞亚群、NK细胞活性、IL-2和CD25水平变化无明显差异,而TPN添加Arg支持后患者的CD4、CD4/CD8比值、NK细胞活性和IL-2水平均明显增加(P<0.05)。本研究结果显示:常规TPN不能纠正胃癌术后患者的淋巴细胞免疫功能抑制,但TPN添加Arg则可促进IL-2生成增加,NK细胞活性增强,改善了胃癌术后患者的淋巴细胞免疫功能,提示TPN添加Arg有免疫促进作用。

THE EFFECTS OF ARGININE SUPPLEMENTATION IN TOTAL PARENTERAL NUTRITION ON LYMPHOCYTIC IMMUNE FUNCTION IN POSTOPERATIVE PATIENTS WITH GASTRIC CANCER

Wang Qi, Wang Jifu, Peng Junsheng.

  Department of Surgery, Guangdong Maternal and Child Health Hospital, Guangzhou 510010

  Abstract To study the effects of arginine supplementation in total parenteral nutrition (TPN) on lymphocytic immune function in postoperative patients with gastric cancer. Thirty six patients with gastric cancer receiving TPN were eligible for entry into randomized and prospective clinical trial of the study. T cell subsets, NK cell activity, plasma IL-2 content and peripheral blood CD25 were measured in before and after parenteral nutrition of the patients. Results: usual TPN could not improve lymphocytic immunosuppression of postoperative patients with gastric cancer. The patients receiving arginine supplementation in TPN might enhance lymphocytic immune function by increasing CD4 level, IL-2 production and NK cell activity, but there was no significant effect of arginine on CD25 expression. Conclusion: there are some effects of supplement with arginine on releasing of the cellular immunosuppression and restoring of lymphocytic immune function.

  Key words  Total parenteral nutrition  Arginine  Immune function  Gastric cancer

  精氨酸(Arg)是一种营养物质兼免疫调节剂,我们在胃肠外营养(TPN)中添加Arg,以期改善胃癌术后患者的淋巴细胞免疫功能,现报告如下。

  1 对象与方法

  1.1 研究对象

  选择1995~1996年中山医科大学附一院胃肠外科收治并经胃镜及病理学证实的36例胃癌患者,男性22例,女性14例,年龄35~67岁,平均56岁,均符合下列条件而被纳入本研究:①肝肾功能正常,无代谢性、感染性和肠道炎性疾病;②未用类固醇激素和免疫抑制剂;③年龄为35~69岁的Ⅱ~Ⅲ期胃癌患者。

  36例患者随机分为3组(拆信封法):①Ⅰ组(对照组,n=12),无脂TPN;②Ⅱ组[MCT/LCT(中长链脂肪乳剂),n=12)],含MCT/LCT的TPN;③Ⅲ组(Arg,n=12),含MCT/LCT和Arg的TPN。3组患者术前均在医院固定膳食,于气管插管、吸入加静脉复合麻醉下手术。术后第1天经锁骨下静脉穿刺中心静脉置管(28例)或经外周静脉(8例)行TPN支持,共7天。氮源为10%复方氨基酸(天津氨基酸公司);脂肪乳剂为10%和20% Lipofundin(Braun,德国);糖为50%、25%和10%葡萄糖溶液;并补充足够维生素、电解质和微量元素。L-Arg(上海生物化学制药厂)。以上营养制剂以“全合一”混合于三升袋中,12小时左右内输完。能量和氮量均按KP营养计算尺计算,热卡:30~35 kcal/kg.d,氮:0.20~0.25g/kg.d,脂肪乳剂占非蛋白热卡的35%左右,Arg为25g/d。分别于术前和术后TPN结束后取患者外周空腹静脉血进行免疫检测。另取22例年龄和性别相近的胃肠道良性疾病患者,测定其术前淋巴细胞免疫功能作为正常参照值。

  1.2 主要试剂和检测方法

  1.2.1 T淋巴细胞亚群测定 抗致敏红细胞花环试剂CD3、CD4和CD8(武汉生物制品所),采用单抗红细胞花环法检测,按试剂盒说明书进行。

  1.2.2 NK细胞活性测定HT5SS〗 MTT比色法检测〔1〕

  1.2.3 IL-2含量测定 用125I-IL-2 RIA试剂盒检测血中IL-2含量,按说明书操作。

  1.2.4 CD25 用CD25单抗以EPICS FLITE流式细胞仪(FCM,美国Coulter公司)测定外周血CD25百分率。

  1.3 统计学处理

  数据用±s表示,t检验,等级相关分析,SPSS软件处理。

  2 结果

  2.1 一般情况

  36例胃癌患者均成功地实施了胃癌根治术,其中行远端胃次全切除术25例,全胃切除术11例。术中及术后均无明显并发症发生。常规行TPN监测,也无代谢及导管并发症。患者术中均有输血(400±200ml)。3组患者在年龄、体重、术式及胃癌分期方面均相近,具可比性。

  2.2 T淋巴细胞亚群变化

  结果见表1。从表1中可见,Ⅰ、Ⅱ组患者手术及TPN后CD4及CD4/CD8水平均较术前有所下降,但Ⅲ组(Arg组)患者的CD4明显高于术前水平(P<0.05),CD4/CD8比值也较术前明显升高(P<0.05)。

表1 3组患者T淋巴细胞亚群变化(±s)

组别 n CD3(%) CD4(%) CD8(%) CD4/CD8
术前 手术及TPN后 术前 手术及TPN后 术前 手术及TPN后 术前 手术及TPN后
Ⅰ组 12 48.3±17.1 46.5±13.6 36.0±9.9 36.4±8.9 26.8±7.2 29.3±9.4 1.39±0.42 1.36±0.55
Ⅱ组 12 44.8±14.1 47.2±12.6 37.6±6.5 36.6±10.7 25.1±6.8 29.8±9.9 1.46±0.55 1.26±0.25
Ⅲ组 12 49.0±13.0 55.7±13.4 34.0±10.4 43.9±7.2* 27.7±6.9 29.8±10.3 1.25±0.38 1.61±0.55*

与术前比较,*P<0.05

  2.3 NK细胞活性及IL-2和CD25水平变化

  结果见表2。从表2中可见,Ⅰ、Ⅱ组患者手术及TPN后的NK细胞活性及IL-2水平均较术前有所下降,但Ⅲ组患者手术及TPN后的NK细胞活性却较术前有明显增加(P<0.05),但仍比胃肠道良性疾病者低(57.4%±15.4%);IL-2水平也有升高,与术前比较有显著性差异(P<0.01),但也低于胃肠道良性疾病者的水平(14.2±7.5ng/ml)。3组患者手术及TPN后的CD25仅轻微上升,但与术前比较无显著性差异。

表2 3组患者的NK细胞活性、IL-2和CD25变化(±s)

组别 n NK细胞活性(%) IL-2(ng/ml) CD25(%)
术前 手术及TPN后 术前 手术及TPN后 术前 手术及TPN后
Ⅰ组 12 29.5±8.6 28.0±5.1 9.9±2.8 8.8±2.2 8.8±4.9 9.1±5.9
Ⅱ组 12 34.2±6.3 32.7±7.9* 9.9±2.5 8.6±1.9 7.2±2.3 9.2±4.3
Ⅲ组 12 30.8±5.7 40.9±9.9* 9.3±2.6 11.6±3.5** 7.7±4.0 9.5±3.0

与术前比较, *P<0.05;**P<0.01

  2.4 等级相关分析

  3组患者之IL-2与NK细胞活性和CD4均呈正相关关系(表3)。

表3 IL-2与NK细胞活性和CD4的相关分析(术后)

组别 IL-2与NK细胞活性 CD4与IL-2
r P r P
Ⅰ组 0.503 <0.05 0.549 <0.05
Ⅱ组 0.801 <0.01 0.520 <0.05
Ⅲ组 0.647 <0.05 0.587 <0.05

  3 讨论

  一般而言,患者在肿瘤切除术后第1~2天,其细胞免疫功能降低最为明显,术后1周仍低,但已开始恢复并接近术前水平,术后第2周开始逐渐恢复,至第4周左右恢复到正常水平〔2,3〕。常规的TPN支持并不能纠正创伤、应激所致的细胞免疫抑制〔2,4,5〕。而肿瘤患者术后免疫功能的改善对减少肿瘤的扩散和转移是有益的〔6〕

  已有学者研究并应用营养物质兼免疫调节剂Arg,以改善应激所致细胞免疫功能抑制〔2,7〕和肿瘤宿主的免疫抑制〔8,9〕。Arg在代谢应激状态下属必需氨基酸,经Arg酶的作用可转化为鸟氨酸(Orn),从而对免疫系统产生影响〔10〕。有腹腔感染的动物在输入Arg后可增加其存活率〔9〕,并改善其淋巴细胞免疫功能〔5〕。我们曾研究发现,输入脂肪乳剂对细胞免疫无明显抑制作用,其无脂TPN和含脂TPN对纠正术后的细胞免疫抑制作用也不明显〔4〕,本组资料结果亦表明此点;但实验研究提示,过多的长链脂肪酸可能抑制淋巴细胞功能〔11〕。本研究结果表明,对胃癌术后患者行TPN添加Arg支持治疗,有一定程度的缓解术后细胞免疫功能抑制和恢复淋巴细胞免疫功能的作用,TPN添加Arg支持后,患者的CD4和CD4/CD8比值上升,NK细胞活性增加。

  Arg可通过促进IL-2生成增加,提高NK和LAK细胞活性,但对CD25无明显影响〔12〕。本研究中,TPN添加Arg支持后患者的IL-2水平则有明显增加,与NK细胞活性呈显著正相关,但CD25水平则无明显增加。因此,我们认为Arg对术后创伤应激所致细胞免疫功能抑制的调节作用,可能是通过促进IL-2生成增加而起作用的,而Arg对CD25表达则无明显作用。这与Brittenden等〔12〕的研究结果一致。有学者提出Arg加参强可使应激宿主的细胞免疫功能抑制得到更明显改善〔5〕,但尚需进一步临床研究证实。

  参 考 文 献

  1 王新江,陆 华,谷漱燕. 用MTT比色法检测NK细胞活性. 中华实验和临床病毒学杂志, 1992; 6(1)∶69

  2 Daly JM, Reynolds J, Thom A, et al. Immune and metabolic effects of arginine in the surgical patient. Ann Surg, 1988; 208(4)∶512

  3 曹艳英,杨晓梅,周正任等. 原发性肝癌病手术前后NK活性、IL-2产生能力、sIL-2R表达水平的动态实验研究. 中华肿瘤杂志, 1993; 5(2)∶111

  4 王 颀,王吉甫,彭俊生. 两种脂肪乳剂对胃癌术后病淋巴细胞免疫功能的影响. 现代临床普通外科杂志, 1996; 1(3)∶150

  5 张利华,黎介寿. 全肠外营养及免疫调节剂对腹腔感染大鼠免疫功能的调节. 中华实验外科杂志, 1994; 11(4)∶240

  6 Sedman PC, Ramsden CW, Brennan TG, et al. Effects of low perioperative interferon on the surgically induced suppression of antitumour immune responses. Br J Surg, 1988; 75(9)∶976

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  9 Liebberman MD, Nishidka K, Redmond P, et al. Enhancement of interleukin-2 immunotherapy with L-arginine. Ann Surg, 1992; 215(2)∶157

  10 Grossie VB, Nishioka K, Ajan JA, et al. Substitating ornithine for arginine in total parenteral nutrition eliminates enhanced tumor growth. J Surg Oncol, 1992; 50(2)∶161

  11 王 颀,王吉甫,彭俊生. 不同脂肪乳剂对淋巴细胞产生白介素-2能力和膜受体表达影响的研究. 中华实验外科杂志, 1997; 14(增刊)∶153

  12 Brittenden J, Park KGM, Hayes PD, et al. Effect of arginine on natural cytotoxicity in cancer patients and healthy volunteers. Br J Surg, 1992; 79(5)∶442

(1998-02-09收稿,1998-08-24修回)


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