胃癌细胞中nm23蛋白的表达及其临床意义

中国普外基础与临床杂志 1999年第3期第6卷 基础与实验研究

作者：谭建美　方国恩　闻兆章　华积德　沈炎明　毕建威　马立业　赵超英

单位：谭建美　云南省开远市59医院(开远　661000)；方国恩　闻兆章　华积德　沈炎明　毕建威　马立业　赵超英　第二军医大学长海医院

　　关键词： 胃肿瘤；基因产物；nm23蛋白

　　摘要　为探讨胃癌细胞中nm23蛋白表达与胃癌浸润转移的关系，作者采用链霉素-生物素免疫组织化学方法检测了67例手术切除胃癌细胞中的nm23蛋白表达。结果： nm23蛋白在胃癌细胞中的表达阳性率为68.7%； 在管状腺癌中的表达阳性率高于其余组织学类型(P＜0.025)； 在高分化、中分化癌细胞中的表达阳性率高于低分化组(P＜0.05)； 在无淋巴结转移的胃癌细胞中表达阳性率高于有淋巴结转移者；在癌组织浸及肌层的表达阳性率高于局限于粘膜或浸及粘膜下层及浆膜层者。上述结果表明，nm23蛋白表达与组织学类型、分化程度、浸润深度及淋巴结转移均有关。

THE SIGNIFICANCE OF PROTEIN nm23 EXPRESSION IN GASTRIC CANCER CELLS

Tan Jianmei, Fang Guoen, Wen Zhaozhang, et al.

　　Department of General Surgery, The 59 Hospital of Kaiyuan City, Yunnan Province, Kaiyuan 661000

　　Abstract　To evaluate the relations between the protein nm23 expression and infiltration and metastasis of gastric cancer. Sixty seven samples of gastric cancer resected were examined with LSAB-immunohistochemical method, and the protein nm23 expression in gastric cancer cells were studied. Results: Total positive rate of the protein nm23 expression in gastric cancer cells was 68.7%. There were significant differences among different histopathological types degrees of differentiation, extent of infiltrative and metastasis (P＜0.05). Conclusion: The positive rate of protein nm23 expression in gastric cancer cells is 68.7%, which is highly related to the pathological type degree of differentiation, extent of infiltration and metastasis of the tumor.

　　Key words　　Gastric tumor　　Gene product　　nm23 protein

　　自1988年Steeg等^〔1〕首先发现肿瘤转移抑制基因nm23以来，有关该基因与肿瘤转移关系的研究逐渐增多。作者采用链霉素-生物素(LSAB)免疫组织化学方法检测了67例胃癌细胞中的nm23蛋白表达，旨在探讨其与胃癌的组织学类型、分化程度、浸润深度以及淋巴结转移的关系。

　　1　材料与方法

　　选取1994年6月至1997年4月在长海医院外科手术切除的胃癌标本67例，其中男39例，女28例，平均年龄45±15.8岁。所有患者术前均未接受放疗、化疗。标本经10%甲醛固定，石蜡包埋，连续切片，片厚4μm。

　　切片采用LSAB免疫组化染色。nm23兔抗人多克隆抗体和LSAB试剂盒为美国Califonia Biotech Inc产品。以PBS代替一抗为阴性对照，以已知阳性切片作阳性对照。结果判定：细胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性细胞。无阳性细胞或阳性细胞＜5个且着色浅淡者为阴性；阳性细胞≥5个为阳性。统计学分析采用χ²检验。

　　2　结果

　　2.1　胃癌细胞nm23蛋白表达与胃癌组织学类型的关系

　　nm23蛋白在不同组织学类型的胃癌细胞中均有表达，总阳性率为68.7%，其中管状腺癌中阳性率高于低分化腺癌、印戒细胞癌及粘液腺癌(P＜0.025)，见表1。

表1　胃癌细胞nm23表达与胃癌组织学类型的关系

　　与其余3组比较，*P＜0.0252.2　胃癌细胞nm23蛋白表达与胃癌组织分化程度的关系

　　nm23蛋白在不同分化程度的胃癌细胞中均有表达，其表达与分化程度关系密切，随分化程度降低而减弱。高分化及中分化组分别与低分化组比较，均有显著性差异(P＜0.05)，见表2。

表2　胃癌细胞nm23表达与胃癌分化程度的关系

　　与低分化组比较，*P＜0.052.3　胃癌细胞nm23蛋白表达与胃癌淋巴结转移的关系

　　在不伴有淋巴结转移的胃癌细胞中，nm23蛋白表达阳性率较伴有淋巴结转移者明显增高(P＜0.025)，见表3。

表3　胃癌细胞nm23表达与胃癌淋巴结转移的关系

　　与淋巴结转移阳性组比较， *P＜0.0252.4　胃癌细胞nm23蛋白表达与胃癌浸润深度的关系

　　随胃癌浸润深度不同，胃癌细胞nm23蛋白表达具有不同的阳性率。其中肌层最高，与粘膜、粘膜下层及浆膜层比较，差异非常显著(P＜0.01)，见表4。

表4　胃癌细胞nm23表达与胃癌浸润深度的关系

　　与其余两组比较，*P＜0.013　讨论

　　现已知nm23编码一种分子量为17 kd的蛋白质，人类nm23基因有nm23-H1和nm23-H2两种亚型^〔2〕。近年研究表明，nm23蛋白在不同肿瘤细胞中均有表达，而表达水平的差异性可能与肿瘤的浸润、转移有关^〔3～5〕。

　　本实验检测结果表明，nm23蛋白在胃癌细胞中有较高水平的表达，总阳性率为68.7%。在不同组织学类型中阳性表达率不一致，管状腺癌组明显高于其它病理类型组，说明病理诊断为低转移性癌细胞中nm23蛋白有高水平的表达，这可能与其参与肿瘤细胞形成过程的调节有关^〔2〕。分化程度不同，nm23蛋白阳性表达率也不一致，有随分化程度降低而表达减弱的趋势，高分化组、中分化组与低分化组间比较有显著性差异。有人认为这也许是因为nm23可能属于分化基因，它促使肿瘤细胞分化，使恶性程度降低^〔2〕。

　　本实验检测结果还表明，nm23蛋白表达与胃癌浸润深度呈明显的相关性。当肿瘤侵犯肌层时阳性率最高，而肿瘤位于粘膜、粘膜下层或突破浆膜层时阳性率均较低，其中2例粘膜内癌则均为阴性，差异非常显著。笔者推测这可能是因为nm23蛋白表达需经过某种特定的刺激和启动过程。肿瘤形成伊始并没有nm23蛋白的表达，而是随肿瘤的进展，由于某种刺激或某种机理的启动促使nm23蛋白表达，且随肿瘤的进一步浸润发展而增强；另一方面，肿瘤针对nm23蛋白表达而启动某种反抑制机理，使nm23蛋白表达趋于减弱甚至消失。基于此，笔者认为，在研究动物模型胃癌自然病程中，若能动态检测nm23蛋白表达的变化，则有可能获得更重要的发现。

　　此外，本实验结果还表明，nm23蛋白表达与胃癌淋巴结转移有关。在淋巴结转移阴性者nm23蛋白表达阳性率明显高于淋巴结转移阳性者，说明nm23基因参与了胃癌淋巴结转移过程的调节。这也许是因为nm23基因参与细胞微管的集合与解聚过程，以及干预某些基因的调节，尤其是ras、ELa等，而起转移负调控作用所致。国内雷文东等^〔6〕在研究肺癌时发现，nm23基因与淋巴结转移的关系受病理组织学类型的影响，在胃癌中是否存在同样的现象有待于进一步观察。

　　目前，临床对nm23蛋白表达的检测多限于手术后进行，其意义是肯定的。但是，如果能在术前完成此项工作，即利用胃镜活检胃癌组织，在获取组织学类型的同时检测nm23蛋白，将对术前判断胃癌的浸润与转移，指导临床分期以及制订治疗方案等都具有更积极的意义。nm23基因是否有助于预后判断，尚有待于进一步随访观察。

　　参考文献

　　1　Steeg PS, Beviacpua G, Kopper L, et al. Evidence for a novel gene associate with low tumor metastaticpotential. J Natl Cancer Inst, 1988; 80(3)∶200

　　2　高　进主编.癌的侵袭与转移基础研究与临床. 第1版. 北京： 北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社， 1996∶117～119

　　3　王吾如. 关于癌转移的分子病理学研究. 中华病理学杂志， 1994； 23(4)∶197

　　4　黎明星. nm23基因与肿瘤转移. 国外医学分子生物学分册， 1994； 16(2)∶73

　　5　Myeroff LL, Markowitz SD. nm23-into the basement (Menbrane). J Natl Cancer Inst, 1994; 86(24)∶1815

　　6　雷文东， 张汝刚， 闰水忠等. nm23基因在人肺癌中的表达及其与肺癌淋巴结转移的关系. 中华肿瘤杂志， 1994； 16(4)∶227

(1998-08-05收稿，1998-11-30修回)